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安捷倫色譜柱使用緩沖鹽的具體方法

 更新時間:2018-08-22 點擊量:1308
   安捷倫色譜柱老化的方法通常是將色譜柱升至一恒定溫度,通常為其溫度上限。特殊情況下,可加熱至使用溫度之上約10~20℃左右,但是一定不能超過色譜柱的溫度上限,那樣極易損壞色譜柱。
  
  當到達老化溫度后,記錄并觀察基線。初始階段基線應持續上升,在到達老化溫度后5~10分鐘開始下降,并且會持續30~90分鐘。當到達一個固定的值后就會穩定下來。如果在2~3小時后基線仍無法穩定或在15~20分鐘后仍無明顯的下降趨勢,那么有可能系統有泄漏或者污染。遇到這樣的情況,應立即將柱溫降到40℃以下,盡快的檢查系統并解決相關的問題。如果還是繼續的老化,不僅對安捷倫色譜柱有損壞而且始終得不到正常穩定的基線。
  
  另外,老化的時間也不宜過長,不然會降低色譜柱的使用壽命。一般來說,涂有極性固定相和較厚涂層的色譜柱老化時間長,而弱極性固定相和較薄涂層的色譜柱所需時間較短。
  
  正確使用安捷倫色譜柱緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結為一句話:使用前要過濾,使用后要沖洗。具體方法如下:
  
  1、等度條件:使用緩沖鹽前和使用后需用過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗60min;使用后去除緩沖鹽的另一個方法是用過渡流動相以0.2ml/min流速沖洗安捷倫色譜柱過夜。
  
  2、梯度條件:用含有緩沖鹽的流動相跑梯度之前,用與初始流動相組成相同的過渡流動相以1.0ml/min流速沖洗60min,再用該過渡流動相以1.0ml/min沖洗安捷倫色譜柱120min。含緩沖鹽流動相的梯度設定應盡量平緩,以避免梯度過程中緩沖鹽析出。
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